A.I. Polinova, D.R. Zagirova, L.Yu. Kokaeva, I.I. Busko, I.V. Levantsevich, S.N. Elansky
In l'ultimi anni, u statu fitosanitariu di e patate è di e sementi si hè deterioratu in Bielorussia. U rolu di certi tipi d'organismi dannosi è u so raportu in l'agrofitocenosi hè cambiatu. A preghjudiziu di parechje malatie micca solu diffuse (tizina tardiva, alternariati, tutti i tippi di scab, bacteriosi, putru seccu fusarium) hè aumentata, ma ancu di novi, insufficientemente studiati, cum'è a putrefazione acquosa di a ferita (Fig. 1). Sta malatia, chì si verifica in India, in Asia Centrale è in altri paesi di u sudu, hè stata nutata in e regioni di Gomel, Brest, Grodno è Minsk in Bielorussia. Cum'è l'altri oomiceti chì abitanu u tarrenu, P. ultimum provoca danni enormi in cundizioni di umidità eccessiva - in e zone pocu drenate, durante e piove prolungate (Taylor et al., 2008).
In Bielorussia, a diffusione di a malatia hè stata nutata in anni cù una temperatura aumentata di a stagione di crescita: in alcuni lotti di patate, 8-10% di i tuberi sò stati influenzati. A putrefazione acquosa ferita di i tuberi pò causà danni significativi, chì sò causati da a mancanza di varietà resistenti, misure di prutezzione sviluppate è u rapidu sviluppu di a malattia in casu di danni à i tuberi (Zhuromskaya, 2003; Ivanyuk et al., 2005). A malatia affetta solu i tuberi. In Russia, a putrefazione acquosa ferita ùn hè ancu significativa.
In questu travagliu, avemu investigatu 4 ceppi di agenti causativi di putrefazione acquosa ferita isolati da i tuberi di patate colpiti di varietà Vektar Bielorussiana, Skarb è ibridi di selezzione in i magazzini di u Centru Scentificu è Praticu di l'Accademia Naziunale di Scienze di Bielorussia per a Patata è l'Orticultura (regione Minsk). L'ubbiettivi di u studiu eranu di determinà e spezie appartenenti à l'isolati isolati, a so virulenza in relazione à i tuberi di patata, per valutà a crescita à e diverse temperature ambientali è a resistenza à u metalaxyl.
U miceliu di l'isulati hè statu cultivatu nantu à un mediu di piselli liquidi (180 g di piselli verdi congelati sò stati bolliti per 10 minuti in 1 litru d'acqua distillata, dopu chì sò stati autoclavati à 30 atm per 1 minuti); L'ADN hè statu isolatu da ogni ceppu. Per l'isulamentu di l'ADN, u miceliu ghjalatu hè statu trituratu in azotu liquidu, lisatu in buffer CTAB, è dopu deproteinizatu cù cloroformu. U DNA hè statu almacenatu in acqua deionizzata à -20 ° С. L'analisi di e sequenze nucleotidiche di regioni genomiche specifiche à e spezie (regioni di geni ribosomali nucleari 18S è 5,8S, oltre à u spaziatore intergenicu trascrittu internu ITS1), amplificatu aduprendu i primer ITS1 è ITS2 (White, 1990), hà mostratu chì e ceppe studiate appartenenu à e spezie Pythium ultimum Trow. (sinonimu Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo & Kakish).
Tutti i ceppi studiati anu influenzatu fette di tuberi di patata Gala posti in camere umide. E macchie scure sò state furmate nantu à elli, diventendu più tardi in ulceri umidi profondamente penetranti (Fig. 2). L'infezzione hè stata effettuata piazzendu u miceliu P. ultimum in u centru di a fetta di tuberu.
I dischi di tuberi inoculati sò stati incubati à + 22 ° C. U ritmu massimu di crescita di l'area affettata hè stata nutata in i primi 2 ghjorni, dopu a zona di l'ulcera hè stata praticamente immutata.
Stu mudellu era validu per tutte e ceppi studiati.
U ritmu di crescita di e ceppe hè statu stimatu nantu à u mediu agar d'avena à temperature di 5, 15, 24 è 34 ° C (Fig. 3). A crescita hè stata osservata à tutte e temperature; u ritimu massimu di crescita hè statu osservatu à 24 ° C (a cuppa di 86 mm hè stata cumpletamente invasa in 2 ghjorni). À 15 è 34 ° C, u ritmu di crescita era significativamente più bassu (a tazza era invasa in 4 è 3 ghjorni, rispettivamente).
À temperature di 15, 24 è 34 ° C, i tassi di crescita di tutte e ceppe studiate ùn anu micca differitu. À una temperatura di 5 ° C, a ceppa P1 hè cresciuta assai più veloce di l'altri (20 mm u ghjornu 4), P4 - un pocu più lenta (10 mm u ghjornu 4), P2 è P3 praticamente ùn crescenu.
Ci hè ancu da nutà chì à una temperatura di 24 ° C a crescita cuminciò subitu dopu à piantà nantu à un piattu, à temperature di 15 è 34 ° C ci hè statu un ritardu in l'iniziu di a crescita attiva di 1 ghjornu, è à 5 ° C - di 2 ghjorni.
U metalaxyl (è u so isomer mefenoxam) sò ricunnisciuti cum'è i farmaci più efficaci per u cuntrollu di l'omiceti di a terra. Metalaxil hè capace di penetrà i tuberi è di furnisce (ancu à concentrazioni assai basse) a so prutezzione à longu andà (Taylor et al., 2008; Bruin et al., 1982). Tuttavia, l'efficacia di u metalaxyl diminuisce bruscamente dopu l'apparizione di ceppi resistenti in e populazioni. Ceppi assai resistenti sò stati trovati in parechje regioni di i Stati Uniti (Taylor et al., 2002). Ùn ci hè micca dati nantu à a resistenza di e ceppi bielorussi di P. ultimum à metalaxyl, è per quessa hè statu decisu di pruvà a so resistenza à a droga in questu travagliu.
U studiu di a suscettibilità à u fungicida metalaxyl hè statu fattu nantu à u mezzu di agar d'avena cù l'aggiunta di fungicida à diverse concentrazioni (Pobedinskaya è Elansky, 2014).
I ceppi studiati anu avutu qualchì differenza in resistenza à u metalaxyl (Table 1). Cusì, à una concentrazione di fungicida di 1 mg / l, a crescita di u ceppu P4 si ferma cumpletamente, è u restu di e ceppe hè statu assai rallentatu. E Ceppi P1 è P2 crescenu assai pianu nantu à un mediu cù una concentrazione di metalaxyl di 10 mg / L. A concentrazione efficace calculata EC50 (a concentrazione di u fungicida rallentendu u ritmu di crescita di a ceppa di 2 volte in quantu à u cuntrollu) per tutte e ceppi era menu di 1 mg / L. Cusì, tutte e razze investigate eranu suscettibili à u metalaxyl; hè statu dimustratu chì hè altamente efficace per inibisce a crescita di P. ultimum.
Sicondu Bruin et al. (1982) dopu à u trattamentu di e piante durante a vegetazione cù metalaxyl à una dosa di 0,5 kg / ha, l'accumulazione di fungicida in i tuberi era di 0,055 μg / g in u peridermu, 0,022 μg / g in u stratu corticale è 0,034 μg / g in a parte centrale di u tuberu. Sicondu i nostri dati, sta cuncintrazione di metalaxyl hè insufficiente per contrarizza a malatia, ma pò rallentà u so sviluppu.
Quandu cresce nantu à u mediu d'avena, tutte e ceppe formanu oospore in monocultura (Fig. 4), chì hè tipicu per P. ultimum. A splicing in coppia di e ceppe ùn hà mostratu sintomi visibili di incompatibilità vegetativa - e tazze eranu coperte uniformemente di miceliu.
I dati uttenuti indicanu chì P. ultimum hè un fitopatogenu capace di cresce rapidamente in una larga gamma di temperature, ancu à una temperatura di conservazione di 5 ° C. Hè virulente per i tessuti di i tuberi di patate è forma oospore capaci di sopravvivenza à longu andà. Cusì, a spezia hè un fitopatogenu periculosu chì pò pone una minaccia per l'agricultura è hà bisognu di studii supplementari.
A ricerca hè stata fatta cù u sustegnu di a Fundazione Russa per a Scienza (prugettu N 14-50-00029).
Tabella 1. Sensibilità di ceppi di P. ultimum à metalaxyl
Strain | Concentrazione di metalaxyl, mg / l | ||
0 (cuntrollu) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
Circa. I dati mediati per 3 misurazioni sò dati.
L'articulu hè statu publicatu in a rivista "Protezzione di a Patata" (N ° 1, 2017)